1. Tujuan: Prosedur ini bertujuan untuk memberikan prosedur standar untuk operasi aseptik dan perlindungan ruangan steril.
2. Lingkup aplikasi: laboratorium pengujian biologi
3. Penanggung Jawab: Penguji Supervisor QC
4.Definisi: Tidak ada
5. Tindakan pencegahan keamanan
Melakukan operasi aseptik secara ketat untuk mencegah kontaminasi mikroba;operator harus mematikan lampu UV sebelum memasuki ruangan steril.
6.Prosedur
6.1.Ruang steril harus dilengkapi dengan ruang operasi steril dan ruang penyangga.Kebersihan ruang operasi steril harus mencapai kelas 10000. Suhu dalam ruangan harus dijaga pada 20-24°C dan kelembaban harus dijaga pada 45-60%.Kebersihan bangku yang bersih harus mencapai kelas 100.
6.2.Ruangan steril harus tetap bersih, dan dilarang keras menumpuk kotoran untuk mencegah kontaminasi.
6.3.Cegah secara ketat kontaminasi semua peralatan sterilisasi dan media kultur.Mereka yang terkontaminasi harus berhenti menggunakannya.
6.4.Ruang steril harus dilengkapi dengan disinfektan konsentrasi kerja, seperti larutan kresol 5%, alkohol 70%, larutan klormetionin 0,1%, dll.
6.5.Ruangan steril harus disterilkan secara teratur dan dibersihkan dengan disinfektan yang sesuai untuk memastikan kebersihan ruangan steril memenuhi persyaratan.
6.6.Semua instrumen, instrumen, piring dan barang-barang lainnya yang perlu dibawa ke ruang steril harus dibungkus rapat dan disterilkan dengan metode yang tepat.
6.7.Sebelum memasuki ruang steril, petugas harus mencuci tangan dengan sabun atau disinfektan, kemudian berganti pakaian kerja khusus, sepatu, topi, masker dan sarung tangan di ruang penyangga (atau menyeka tangan kembali dengan etanol 70%) sebelum memasuki ruang steril.Lakukan operasi di ruang bakteri.
6.8.Sebelum menggunakan ruangan steril, lampu ultraviolet pada ruangan steril harus dinyalakan untuk penyinaran dan sterilisasi lebih dari 30 menit, dan meja bersih harus dinyalakan secara bersamaan untuk meniupkan udara.Setelah operasi selesai, ruangan steril harus dibersihkan tepat waktu dan kemudian disterilkan dengan sinar ultraviolet selama 20 menit.
6.9.Sebelum pemeriksaan, kemasan luar sampel uji harus tetap utuh dan tidak boleh dibuka untuk mencegah kontaminasi.Sebelum pemeriksaan, gunakan bola kapas alkohol 70% untuk mendisinfeksi permukaan luar.
6.10.Selama setiap pengoperasian, pengendalian negatif harus dilakukan untuk memeriksa keandalan pengoperasian aseptik.
6.11.Saat menyerap cairan bakteri, Anda harus menggunakan bola penghisap untuk menyerapnya.Jangan menyentuh sedotan langsung dengan mulut Anda.
6.12.Jarum inokulasi harus disterilkan dengan api sebelum dan sesudah digunakan.Setelah dingin, kultur dapat diinokulasi.
6.13.Sedotan, tabung reaksi, cawan petri dan peralatan lain yang mengandung cairan bakteri harus direndam dalam ember sterilisasi yang berisi larutan Lysol 5% untuk disinfeksi, dan dikeluarkan serta dibilas setelah 24 jam.
6.14.Jika ada cairan bakteri yang tumpah di meja atau lantai, sebaiknya segera tuangkan larutan asam karbol 5% atau Lysol 3% pada area yang terkontaminasi minimal 30 menit sebelum diobati.Jika pakaian kerja dan topi terkontaminasi cairan bakteri, maka harus segera dilepas dan dicuci setelah sterilisasi uap bertekanan tinggi.
6.15.Semua barang yang mengandung bakteri hidup harus didesinfeksi sebelum dibilas di bawah keran.Dilarang keras mencemari saluran pembuangan.
6.16.Jumlah koloni di ruang steril harus diperiksa setiap bulan.Dengan bangku bersih terbuka, ambil sejumlah cawan petri steril dengan diameter dalam 90 mm, dan suntikkan secara aseptik sekitar 15 ml media kultur agar nutrisi yang telah dicairkan dan didinginkan hingga suhu sekitar 45°C.Setelah pemadatan, letakkan terbalik pada suhu 30 hingga 35. Inkubasi selama 48 jam dalam inkubator ℃.Setelah terbukti steril, ambil 3 sampai 5 piring dan letakkan di kiri, tengah dan kanan posisi kerja.Setelah membuka penutup dan memaparkannya selama 30 menit, letakkan secara terbalik dalam inkubator bersuhu 30 hingga 35°C selama 48 jam dan keluarkan.meneliti.Rata-rata jumlah bakteri lain-lain pada piring di ruang bersih kelas 100 tidak boleh melebihi 1 koloni, dan jumlah rata-rata di ruang bersih kelas 10.000 tidak boleh melebihi 3 koloni.Jika batas tersebut terlampaui, ruangan steril harus didesinfeksi secara menyeluruh sampai pemeriksaan berulang memenuhi persyaratan.
7. Lihat bab (Metode Pemeriksaan Sterilitas) dalam "Metode Pemeriksaan Higienis Obat" dan "Praktik Operasi Standar Tiongkok untuk Pemeriksaan Obat".
8. Departemen Distribusi: Departemen Manajemen Mutu
Panduan teknis ruang bersih:
Setelah memperoleh lingkungan steril dan bahan steril, kita harus menjaga keadaan steril untuk mempelajari mikroorganisme tertentu yang diketahui atau memanfaatkan fungsinya.Jika tidak, berbagai mikroorganisme dari luar dapat dengan mudah bercampur. Fenomena tercampurnya mikroorganisme yang tidak relevan dari luar disebut bakteri pencemar dalam mikrobiologi.Mencegah kontaminasi adalah teknik penting dalam pekerjaan mikrobiologi.Sterilisasi menyeluruh di satu sisi dan pencegahan kontaminasi di sisi lain merupakan dua aspek teknik aseptik.Selain itu, kita harus mencegah mikroorganisme yang diteliti, terutama mikroorganisme patogen atau mikroorganisme hasil rekayasa genetika yang tidak ada di alam, agar tidak keluar dari wadah percobaan kita ke lingkungan luar.Untuk tujuan ini, dalam mikrobiologi, ada banyak tindakan.
Ruang steril biasanya merupakan ruangan kecil yang khusus didirikan di laboratorium mikrobiologi.Dapat dibuat dengan lembaran dan kaca.Luasnya tidak boleh terlalu besar, sekitar 4-5 meter persegi, dan tingginya sekitar 2,5 meter.Ruang penyangga harus disiapkan di luar ruang steril.Pintu ruang penyangga dan pintu ruang steril tidak boleh menghadap ke arah yang sama untuk mencegah aliran udara masuknya bakteri lain-lain.Baik ruang steril maupun ruang penyangga harus kedap udara.Peralatan ventilasi dalam ruangan harus memiliki alat penyaring udara.Lantai dan dinding ruangan steril harus licin, sulit menampung kotoran dan mudah dibersihkan.Permukaan kerja harus rata.Baik ruang steril maupun ruang penyangga dilengkapi dengan lampu ultraviolet.Lampu ultraviolet di ruang steril berjarak 1 meter dari permukaan kerja.Staf yang memasuki ruang steril harus mengenakan pakaian dan topi yang disterilkan.
Saat ini ruangan steril banyak terdapat di pabrik mikrobiologi, sedangkan laboratorium umum menggunakan clean bench.Fungsi utama clean bench adalah menggunakan perangkat aliran udara laminar untuk menghilangkan berbagai debu kecil termasuk mikroorganisme di permukaan kerja.Alat elektrik ini memungkinkan udara melewati filter hepa kemudian masuk ke permukaan kerja, sehingga permukaan kerja selalu terkendali aliran udara steril.Selain itu, terdapat tirai udara berkecepatan tinggi di sisi dekat luar untuk mencegah masuknya udara bakteri dari luar.
Di tempat dengan kondisi sulit, kotak kayu steril juga dapat digunakan sebagai pengganti bangku bersih.Kotak steril memiliki struktur yang sederhana dan mudah dipindahkan.Terdapat dua lubang di bagian depan kotak yang tertutup oleh pintu tarik-dorong saat tidak digunakan.Anda dapat merentangkan tangan selama pengoperasian.Bagian depan atas dilengkapi dengan kaca untuk memudahkan pengoperasian internal.Terdapat lampu ultraviolet di dalam kotak, dan peralatan serta bakteri dapat masuk melalui pintu kecil di sampingnya.
Teknik pengoperasian aseptik saat ini tidak hanya memainkan peran penting dalam penelitian dan aplikasi mikrobiologi, namun juga banyak digunakan dalam banyak bioteknologi.Misalnya teknologi transgenik, teknologi antibodi monoklonal, dll.
Waktu posting: 06-Mar-2024