1. Tujuan: Prosedur ini bertujuan untuk memberikan prosedur standar untuk operasi aseptik dan perlindungan kamar steril.
2. Lingkup Aplikasi: Laboratorium Pengujian Biologis
3. Orang yang Bertanggung Jawab: Penguji Pengawas QC
4. Definisi: Tidak ada
5. Tindakan Pencegahan Keselamatan
Secara ketat melakukan operasi aseptik untuk mencegah kontaminasi mikroba; Operator harus mematikan lampu UV sebelum memasuki kamar steril.
6. Proses
6.1. Kamar steril harus dilengkapi dengan ruang operasi steril dan ruang penyangga. Kebersihan ruang operasi steril harus mencapai kelas 10000. Suhu dalam ruangan harus dipertahankan pada 20-24 ° C dan kelembaban harus dipertahankan pada 45-60%. Kebersihan bangku bersih harus mencapai kelas 100.
6.2. Kamar steril harus tetap bersih, dan dilarang secara ketat menumpuk puing -puing untuk mencegah kontaminasi.
6.3. Benar -benar mencegah kontaminasi semua peralatan sterilisasi dan media budaya. Mereka yang terkontaminasi harus berhenti menggunakannya.
6.4. Kamar steril harus dilengkapi dengan disinfektan konsentrasi kerja, seperti larutan cresol 5%, 70% alkohol, larutan chlormethionine 0,1%, dll.
6.5. Kamar steril harus disterilkan secara teratur dan dibersihkan dengan desinfektan yang sesuai untuk memastikan bahwa kebersihan ruang steril memenuhi persyaratan.
6.6. Semua instrumen, instrumen, piring, dan barang -barang lain yang perlu dibawa ke ruang steril harus dibungkus dengan ketat dan disterilkan dengan metode yang sesuai.
6.7. Sebelum memasuki ruang steril, staf harus mencuci tangan dengan sabun atau desinfektan, dan kemudian berganti menjadi pakaian kerja khusus, sepatu, topi, topeng dan sarung tangan di ruang buffer (atau menyeka tangan mereka lagi dengan 70% etanol) sebelum memasuki ruang steril. Melakukan operasi di ruang bakteri.
6.8. Sebelum menggunakan ruang steril, lampu ultraviolet di ruang steril harus dihidupkan untuk iradiasi dan sterilisasi selama lebih dari 30 menit, dan bangku bersih harus dihidupkan untuk peniup udara pada saat yang sama. Setelah operasi selesai, ruang steril harus dibersihkan dalam waktu dan kemudian disterilkan dengan sinar ultraviolet selama 20 menit.
6.9. Sebelum inspeksi, pengemasan luar sampel uji harus tetap utuh dan tidak boleh dibuka untuk mencegah kontaminasi. Sebelum inspeksi, gunakan 70% alkohol bola kapas untuk mendisinfeksi permukaan luar.
6.10. Selama setiap operasi, kontrol negatif harus dilakukan untuk memeriksa keandalan operasi aseptik.
6.11. Saat menyerap cairan bakteri, Anda harus menggunakan bola hisap untuk menyerapnya. Jangan menyentuh sedotan langsung dengan mulut Anda.
6.12. Jarum inokulasi harus disterilkan dengan api sebelum dan sesudah setiap penggunaan. Setelah pendinginan, kultur dapat diinokulasi.
6.13. Sedotan, tabung reaksi, cawan petri, dan peralatan lain yang mengandung cairan bakteri harus direndam dalam ember sterilisasi yang mengandung larutan lysol 5% untuk desinfeksi, dan dibilas dan dibilas setelah 24 jam.
6.14. Jika ada cairan bakteri yang tumpah di atas meja atau lantai, Anda harus segera menuangkan larutan asam karbol 5% atau lysol 3% pada area yang terkontaminasi setidaknya selama 30 menit sebelum merawatnya. Ketika pakaian kerja dan topi terkontaminasi dengan cairan bakteri, mereka harus segera dilepas dan dicuci setelah sterilisasi uap bertekanan tinggi.
6.15. Semua item yang mengandung bakteri hidup harus didesinfeksi sebelum dibilas di bawah keran. Sangat dilarang untuk mencemari saluran pembuangan.
6.16. Jumlah koloni di kamar steril harus diperiksa setiap bulan. Dengan bangku bersih terbuka, ambil sejumlah cawan petri steril dengan diameter dalam 90 mm, dan secara aseptik menyuntikkan sekitar 15 mL media kultur nutrisi yang telah dilebur dan didinginkan hingga sekitar 45 ° C. Setelah pemadatan, letakkan terbalik pada 30 hingga 35 inkubasi selama 48 jam dalam ℃ inkubator. Setelah membuktikan sterilitas, ambil 3 hingga 5 piring dan letakkan di sebelah kiri, tengah dan kanan posisi kerja. Setelah membuka penutup dan mengeksposnya selama 30 menit, letakkan terbalik dalam inkubator 30 hingga 35 ° C selama 48 jam dan keluarkan. meneliti. Jumlah rata -rata bakteri lain -lain di piring di area bersih kelas 100 tidak boleh melebihi 1 koloni, dan jumlah rata -rata di ruang kelas 100.000 tidak boleh melebihi 3 koloni. Jika batas terlampaui, ruang steril harus didesinfeksi secara menyeluruh sampai inspeksi berulang memenuhi persyaratan.
7. Rujuk ke bab (Metode Inspeksi Sterilitas) dalam "Metode Inspeksi Higienis Obat" dan "Praktik Operasi Standar China untuk Inspeksi Obat".
8. Departemen Distribusi: Departemen Manajemen Kualitas
Bimbingan Teknis Kamar Bersih:
Setelah mendapatkan lingkungan yang steril dan bahan steril, kita harus mempertahankan keadaan steril untuk mempelajari mikroorganisme yang diketahui spesifik atau memanfaatkan fungsinya. Jika tidak, berbagai mikroorganisme dari luar dapat dengan mudah bercampur. Fenomena pencampuran mikroorganisme yang tidak relevan dari luar disebut bakteri kontaminasi dalam mikrobiologi. Mencegah kontaminasi adalah teknik penting dalam pekerjaan mikrobiologis. Sterilisasi lengkap di satu sisi dan pencegahan kontaminasi di sisi lain adalah dua aspek teknik aseptik. Selain itu, kita harus mencegah mikroorganisme yang diteliti, terutama mikroorganisme patogenik atau mikroorganisme yang direkayasa secara genetik yang tidak ada di alam, dari melarikan diri dari wadah eksperimental kami ke lingkungan eksternal. Untuk tujuan ini, dalam mikrobiologi, ada banyak langkah.
Kamar steril biasanya merupakan ruangan kecil yang secara khusus didirikan di laboratorium mikrobiologi. Dapat dibangun dengan seprai dan kaca. Area tersebut tidak boleh terlalu besar, sekitar 4-5 meter persegi, dan tingginya harus sekitar 2,5 meter. Ruang buffer harus diatur di luar ruang steril. Pintu ruang penyangga dan pintu ruang steril tidak boleh menghadap ke arah yang sama untuk mencegah aliran udara membawa bakteri lain -lain. Kamar steril dan ruang buffer harus kedap udara. Peralatan ventilasi dalam ruangan harus memiliki perangkat penyaringan udara. Lantai dan dinding ruang steril harus halus, sulit untuk menyimpan kotoran dan mudah dibersihkan. Permukaan kerja harus rata. Kamar steril dan ruang buffer dilengkapi dengan lampu ultraviolet. Lampu ultraviolet di ruangan steril berjarak 1 meter dari permukaan kerja. Staf yang memasuki kamar steril harus mengenakan pakaian dan topi yang disterilkan.
Saat ini, kamar steril sebagian besar ada di pabrik mikrobiologi, sementara laboratorium umum menggunakan bangku bersih. Fungsi utama dari bangku bersih adalah menggunakan perangkat aliran udara laminar untuk menghilangkan berbagai debu kecil termasuk mikroorganisme pada permukaan kerja. Perangkat listrik memungkinkan udara melewati filter HEPA dan kemudian memasuki permukaan kerja, sehingga permukaan kerja selalu disimpan di bawah kendali udara steril yang mengalir. Selain itu, ada tirai udara berkecepatan tinggi di sisi dekat ke luar untuk mencegah udara bakteri eksternal masuk.
Di tempat -tempat dengan kondisi sulit, kotak steril kayu juga dapat digunakan sebagai pengganti bangku bersih. Kotak steril memiliki struktur sederhana dan mudah dipindahkan. Ada dua lubang di bagian depan kotak, yang diblokir oleh pintu dorong-tarik saat tidak beroperasi. Anda dapat mengulurkan lengan Anda selama operasi. Bagian atas bagian depan dilengkapi dengan kaca untuk memfasilitasi operasi internal. Ada lampu ultraviolet di dalam kotak, dan peralatan dan bakteri dapat dimasukkan melalui pintu kecil di samping.
Teknik operasi aseptik saat ini tidak hanya memainkan peran penting dalam penelitian dan aplikasi mikrobiologis, tetapi juga banyak digunakan dalam banyak bioteknologi. Misalnya, teknologi transgenik, teknologi antibodi monoklonal, dll.
Waktu posting: Mar-06-2024