1. Tujuan: Prosedur ini bertujuan untuk menyediakan prosedur standar untuk operasi aseptik dan perlindungan ruang steril.
2. Ruang lingkup aplikasi: laboratorium pengujian biologis
3. Penanggung Jawab : Supervisor QC Tester
4. Definisi: Tidak ada
5. Tindakan pencegahan keamanan
Lakukan operasi aseptik secara ketat untuk mencegah kontaminasi mikroba; operator harus mematikan lampu UV sebelum memasuki ruang steril.
6.Prosedur
6.1. Ruang steril harus dilengkapi dengan ruang operasi steril dan ruang penyangga. Kebersihan ruang operasi steril harus mencapai kelas 10000. Suhu ruangan harus dijaga pada 20-24°C dan kelembapan harus dijaga pada 45-60%. Kebersihan meja bersih harus mencapai kelas 100.
6.2. Ruang steril harus dijaga kebersihannya, dan dilarang keras menumpuk sampah untuk mencegah kontaminasi.
6.3. Cegah kontaminasi secara ketat pada semua peralatan sterilisasi dan media kultur. Peralatan yang terkontaminasi harus dihentikan penggunaannya.
6.4. Ruang steril harus dilengkapi dengan disinfektan dengan konsentrasi kerja yang sesuai, seperti larutan kresol 5%, alkohol 70%, larutan klormetionin 0,1%, dll.
6.5. Ruang steril harus disterilkan dan dibersihkan secara berkala dengan disinfektan yang sesuai untuk memastikan kebersihan ruang steril memenuhi persyaratan.
6.6. Semua instrumen, alat, piring, dan barang lain yang perlu dibawa ke ruang steril harus dibungkus rapat dan disterilkan dengan metode yang tepat.
6.7. Sebelum memasuki ruang steril, staf harus mencuci tangan dengan sabun atau disinfektan, lalu berganti pakaian kerja khusus, sepatu, topi, masker, dan sarung tangan di ruang penyangga (atau menyeka tangan kembali dengan etanol 70%) sebelum memasuki ruang steril. Lakukan operasi di bilik bakteri.
6.8. Sebelum menggunakan ruang steril, lampu ultraviolet di ruang steril harus dinyalakan untuk penyinaran dan sterilisasi selama lebih dari 30 menit, dan meja bersih harus dinyalakan untuk penghembusan udara secara bersamaan. Setelah operasi selesai, ruang steril harus dibersihkan tepat waktu dan kemudian disterilkan dengan sinar ultraviolet selama 20 menit.
6.9. Sebelum pemeriksaan, kemasan luar sampel uji harus dijaga tetap utuh dan tidak boleh dibuka untuk mencegah kontaminasi. Sebelum pemeriksaan, gunakan bola kapas alkohol 70% untuk mendisinfeksi permukaan luar.
6.10. Selama setiap operasi, kontrol negatif harus dilakukan untuk memeriksa keandalan operasi aseptik.
6.11. Saat menyerap cairan bakteri, gunakan bola hisap untuk menyerapnya. Jangan menyentuh sedotan langsung dengan mulut Anda.
6.12. Jarum inokulasi harus disterilkan dengan api sebelum dan sesudah digunakan. Setelah dingin, kultur dapat diinokulasi.
6.13. Sedotan, tabung reaksi, cawan petri, dan peralatan lain yang berisi cairan bakteri harus direndam dalam ember sterilisasi berisi larutan Lysol 5% untuk disinfeksi, lalu dikeluarkan dan dibilas setelah 24 jam.
6.14. Jika terdapat cairan bakteri yang tumpah di meja atau lantai, segera siramkan larutan asam karbol 5% atau Lysol 3% pada area yang terkontaminasi selama minimal 30 menit sebelum menanganinya. Jika pakaian kerja dan topi terkontaminasi cairan bakteri, pakaian tersebut harus segera dilepas dan dicuci setelah sterilisasi uap bertekanan tinggi.
6.15. Semua barang yang mengandung bakteri hidup harus didisinfeksi sebelum dibilas di bawah keran. Dilarang keras mencemari saluran pembuangan.
6.16. Jumlah koloni di ruang steril harus diperiksa setiap bulan. Dengan bangku bersih terbuka, ambil sejumlah cawan petri steril dengan diameter dalam 90 mm, dan suntikkan secara aseptik sekitar 15 ml media kultur agar nutrisi yang telah dicairkan dan didinginkan hingga sekitar 45°C. Setelah pemadatan, letakkan terbalik pada 30 hingga 35 Inkubasi selama 48 jam dalam inkubator ℃. Setelah membuktikan sterilitas, ambil 3 hingga 5 piring dan letakkan di kiri, tengah dan kanan posisi kerja. Setelah membuka penutup dan memaparkannya selama 30 menit, letakkan terbalik dalam inkubator 30 hingga 35°C selama 48 jam dan keluarkan. periksa. Jumlah rata-rata bakteri lain-lain pada piring di area bersih kelas 100 tidak boleh melebihi 1 koloni, dan jumlah rata-rata di ruang bersih kelas 10000 tidak boleh melebihi 3 koloni. Jika batas terlampaui, ruang steril harus didisinfeksi secara menyeluruh hingga pemeriksaan berulang memenuhi persyaratan.
7. Lihat bab (Metode Pemeriksaan Sterilitas) dalam "Metode Pemeriksaan Higienis Obat" dan "Praktik Operasional Standar Tiongkok untuk Pemeriksaan Obat".
8. Departemen Distribusi: Departemen Manajemen Mutu
Panduan teknis ruang bersih:
Setelah memperoleh lingkungan dan bahan steril, kita harus mempertahankan kondisi steril agar dapat mempelajari mikroorganisme tertentu yang telah diketahui atau memanfaatkan fungsinya. Jika tidak, berbagai mikroorganisme dari luar dapat dengan mudah bercampur. Fenomena bercampurnya mikroorganisme yang tidak relevan dari luar disebut bakteri pengkontaminasi dalam mikrobiologi. Pencegahan kontaminasi merupakan teknik penting dalam pekerjaan mikrobiologi. Sterilisasi menyeluruh di satu sisi dan pencegahan kontaminasi di sisi lain merupakan dua aspek teknik aseptik. Selain itu, kita harus mencegah mikroorganisme yang diteliti, terutama mikroorganisme patogen atau mikroorganisme hasil rekayasa genetika yang tidak terdapat di alam, agar tidak keluar dari wadah percobaan ke lingkungan eksternal. Untuk tujuan ini, dalam mikrobiologi, terdapat banyak langkah.
Ruang steril biasanya berupa ruangan kecil yang khusus disiapkan di laboratorium mikrobiologi. Dapat dibangun dengan lembaran dan kaca. Areanya tidak boleh terlalu besar, sekitar 4-5 meter persegi, dan tingginya sekitar 2,5 meter. Ruang penyangga harus disiapkan di luar ruang steril. Pintu ruang penyangga dan pintu ruang steril tidak boleh menghadap arah yang sama untuk mencegah aliran udara membawa masuknya bakteri lain-lain. Baik ruang steril maupun ruang penyangga harus kedap udara. Peralatan ventilasi dalam ruangan harus memiliki perangkat penyaringan udara. Lantai dan dinding ruang steril harus halus, sulit menampung kotoran, dan mudah dibersihkan. Permukaan kerja harus rata. Baik ruang steril maupun ruang penyangga dilengkapi dengan lampu ultraviolet. Lampu ultraviolet di ruang steril berjarak 1 meter dari permukaan kerja. Staf yang memasuki ruang steril harus mengenakan pakaian dan topi steril.
Saat ini, ruang steril sebagian besar terdapat di pabrik mikrobiologi, sementara laboratorium umum menggunakan meja bersih. Fungsi utama meja bersih adalah menggunakan perangkat aliran udara laminar untuk menghilangkan berbagai debu halus termasuk mikroorganisme di permukaan kerja. Perangkat elektrik ini memungkinkan udara melewati filter HEPA dan kemudian masuk ke permukaan kerja, sehingga permukaan kerja selalu berada di bawah kendali aliran udara steril. Selain itu, terdapat tirai udara berkecepatan tinggi di sisi yang dekat dengan bagian luar untuk mencegah masuknya udara bakteri dari luar.
Di tempat-tempat dengan kondisi sulit, kotak steril kayu juga dapat digunakan sebagai pengganti bangku bersih. Kotak steril ini memiliki struktur sederhana dan mudah dipindahkan. Terdapat dua lubang di bagian depan kotak, yang ditutup dengan pintu dorong-tarik saat tidak digunakan. Anda dapat merentangkan tangan saat menggunakan kotak. Bagian atas kotak dilengkapi kaca untuk memudahkan pengoperasian internal. Terdapat lampu ultraviolet di dalam kotak, dan peralatan serta bakteri dapat dimasukkan melalui pintu kecil di sampingnya.
Teknik operasi aseptik saat ini tidak hanya memainkan peran penting dalam penelitian dan aplikasi mikrobiologi, tetapi juga banyak digunakan dalam berbagai bioteknologi. Misalnya, teknologi transgenik, teknologi antibodi monoklonal, dan sebagainya.
Waktu posting: 06-Mar-2024