Terdapat dua sumber utama kontaminasi di ruang bersih: partikel dan mikroorganisme, yang dapat disebabkan oleh faktor manusia dan lingkungan, atau aktivitas terkait dalam proses tersebut. Terlepas dari upaya terbaik, kontaminasi tetap akan menembus ruang bersih. Pembawa kontaminasi umum tertentu meliputi tubuh manusia (sel, rambut), faktor lingkungan seperti debu, asap, kabut atau peralatan (peralatan laboratorium, peralatan pembersih), dan teknik penyeka serta metode pembersihan yang tidak tepat.
Pembawa kontaminasi yang paling umum adalah manusia. Bahkan dengan pakaian pelindung yang paling ketat dan prosedur operasi yang paling ketat, operator yang tidak terlatih dengan baik merupakan ancaman terbesar kontaminasi di ruang bersih. Karyawan yang tidak mengikuti pedoman ruang bersih merupakan faktor risiko tinggi. Selama satu karyawan melakukan kesalahan atau melupakan satu langkah, hal itu akan menyebabkan kontaminasi seluruh ruang bersih. Perusahaan hanya dapat memastikan kebersihan ruang bersih dengan pemantauan terus menerus dan pembaruan pelatihan secara terus menerus dengan tingkat kontaminasi nol.
Sumber kontaminasi utama lainnya adalah peralatan dan perlengkapan. Jika gerobak atau mesin hanya dilap secara kasar sebelum memasuki ruang bersih, hal itu dapat membawa masuk mikroorganisme. Seringkali, pekerja tidak menyadari bahwa peralatan beroda melindas permukaan yang terkontaminasi saat didorong ke dalam ruang bersih. Permukaan (termasuk lantai, dinding, peralatan, dll.) secara rutin diuji untuk menghitung jumlah mikroorganisme hidup menggunakan cawan kontak yang dirancang khusus yang berisi media pertumbuhan seperti Trypticase Soy Agar (TSA) dan Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA adalah media pertumbuhan yang dirancang untuk bakteri, dan SDA adalah media pertumbuhan yang dirancang untuk jamur dan ragi. TSA dan SDA biasanya diinkubasi pada suhu yang berbeda, dengan TSA terpapar suhu dalam kisaran 30-35˚C, yang merupakan suhu pertumbuhan optimal untuk sebagian besar bakteri. Kisaran 20-25˚C optimal untuk sebagian besar spesies jamur dan ragi.
Aliran udara dulunya merupakan penyebab umum kontaminasi, tetapi sistem HVAC ruang bersih saat ini hampir sepenuhnya menghilangkan kontaminasi udara. Udara di ruang bersih dikontrol dan dipantau secara teratur (misalnya, harian, mingguan, triwulanan) untuk menghitung jumlah partikel, jumlah mikroorganisme hidup, suhu, dan kelembapan. Filter HEPA digunakan untuk mengontrol jumlah partikel di udara dan memiliki kemampuan untuk menyaring partikel hingga 0,2µm. Filter ini biasanya dioperasikan terus menerus pada laju aliran yang telah dikalibrasi untuk menjaga kualitas udara di ruangan. Kelembapan biasanya dijaga pada tingkat rendah untuk mencegah perkembangbiakan mikroorganisme seperti bakteri dan jamur yang menyukai lingkungan lembap.
Faktanya, tingkat kontaminasi tertinggi dan sumber kontaminasi paling umum di ruang bersih adalah operatornya.
Sumber dan jalur masuk kontaminasi tidak bervariasi secara signifikan dari satu industri ke industri lainnya, tetapi terdapat perbedaan antar industri dalam hal tingkat kontaminasi yang dapat ditoleransi dan yang tidak dapat ditoleransi. Misalnya, produsen tablet yang dapat ditelan tidak perlu menjaga tingkat kebersihan yang sama seperti produsen agen suntik yang langsung dimasukkan ke dalam tubuh manusia.
Produsen farmasi memiliki toleransi yang lebih rendah terhadap kontaminasi mikroba dibandingkan produsen elektronik berteknologi tinggi. Produsen semikonduktor yang memproduksi produk mikroskopis tidak dapat menerima kontaminasi partikulat apa pun untuk memastikan fungsionalitas produk. Oleh karena itu, perusahaan-perusahaan ini hanya memperhatikan sterilitas produk yang akan ditanamkan di dalam tubuh manusia dan fungsionalitas chip atau telepon seluler. Mereka relatif kurang memperhatikan jamur, kapang, atau bentuk kontaminasi mikroba lainnya di ruang bersih. Di sisi lain, perusahaan farmasi memperhatikan semua sumber kontaminasi, baik yang hidup maupun yang mati.
Industri farmasi diatur oleh FDA dan harus secara ketat mengikuti peraturan Praktik Manufaktur yang Baik (GMP) karena konsekuensi kontaminasi di industri farmasi sangat berbahaya. Produsen obat tidak hanya harus memastikan bahwa produk mereka bebas dari bakteri, tetapi mereka juga diharuskan untuk memiliki dokumentasi dan pelacakan segala sesuatu. Perusahaan peralatan berteknologi tinggi dapat mengirimkan laptop atau TV selama lolos audit internalnya. Tetapi hal itu tidak sesederhana itu untuk industri farmasi, itulah sebabnya sangat penting bagi perusahaan untuk memiliki, menggunakan, dan mendokumentasikan prosedur operasi ruang bersih. Karena pertimbangan biaya, banyak perusahaan menyewa jasa pembersihan profesional eksternal untuk melakukan layanan pembersihan.
Program pengujian lingkungan ruang bersih yang komprehensif harus mencakup partikel udara yang terlihat dan tidak terlihat. Meskipun tidak ada persyaratan bahwa semua kontaminan di lingkungan terkontrol ini harus diidentifikasi oleh mikroorganisme, program pengendalian lingkungan harus mencakup tingkat identifikasi bakteri yang sesuai dari ekstraksi sampel. Saat ini tersedia banyak metode identifikasi bakteri.
Langkah pertama dalam identifikasi bakteri, terutama dalam hal isolasi ruang bersih, adalah metode pewarnaan Gram, karena dapat memberikan petunjuk interpretatif mengenai sumber kontaminasi mikroba. Jika isolasi dan identifikasi mikroba menunjukkan kokus Gram-positif, kontaminasi mungkin berasal dari manusia. Jika isolasi dan identifikasi mikroba menunjukkan batang Gram-positif, kontaminasi mungkin berasal dari debu atau strain yang resisten terhadap disinfektan. Jika isolasi dan identifikasi mikroba menunjukkan batang Gram-negatif, sumber kontaminasi mungkin berasal dari air atau permukaan basah lainnya.
Identifikasi mikroba di ruang bersih farmasi sangat diperlukan karena berkaitan dengan banyak aspek jaminan mutu, seperti bioassay di lingkungan manufaktur; pengujian identifikasi bakteri pada produk akhir; organisme tak bernama dalam produk steril dan air; kontrol mutu teknologi penyimpanan fermentasi di industri bioteknologi; dan verifikasi pengujian mikroba selama validasi. Metode FDA untuk memastikan bahwa bakteri dapat bertahan hidup di lingkungan tertentu akan semakin umum digunakan. Ketika tingkat kontaminasi mikroba melebihi tingkat yang ditentukan atau hasil uji sterilitas menunjukkan kontaminasi, perlu untuk memverifikasi efektivitas agen pembersih dan disinfeksi serta menghilangkan identifikasi sumber kontaminasi.
Ada dua metode untuk memantau permukaan lingkungan ruang bersih:
1. Pelat kontak
Cawan kultur khusus ini berisi media pertumbuhan steril, yang disiapkan agar lebih tinggi dari tepi cawan. Penutup cawan kontak menutupi permukaan yang akan diambil sampelnya, dan mikroorganisme apa pun yang terlihat di permukaan akan menempel pada permukaan agar dan berinkubasi. Teknik ini dapat menunjukkan jumlah mikroorganisme yang terlihat di suatu permukaan.
2. Metode Usap
Ini steril dan disimpan dalam cairan steril yang sesuai. Kapas usap diaplikasikan ke permukaan yang akan diuji dan mikroorganisme diidentifikasi dengan mengambil kembali kapas usap ke dalam medium. Kapas usap sering digunakan pada permukaan yang tidak rata atau di area yang sulit diambil sampelnya dengan lempeng kontak. Pengambilan sampel dengan kapas usap lebih merupakan uji kualitatif.
Waktu posting: 21 Oktober 2024